Caractérisation des glucides : Réactions qualitatives

6ème leçon : Caractérisation des réactions des glucides

Réactions qualitatives

1. Réaction de Molisch

L'action de déshydratation de l'acide sulfurique (H₂SO₄) concentré sur les molécules de monosaccharides provoque la formation de furfural (pour les pentoses) et de 5-hydroxyméthylfurfural (pour les hexoses). Ces aldéhydes peuvent se condenser avec l'α-naphtol pour former un produit de condensation de couleur pourpre (anneau). Cette réaction est positive pour tous les glucides (mono-, oligo- ou polysaccharides), libres ou combinés.

a) Réactifs

• Acide sulfurique concentré
• Réactif de Molisch : 5 g d'α-naphtol dans 100 ml d'éthanol

b) Technique

Dans quatre tubes à essai étiquetés A, B, C et D :

• Tube A : 2 ml de glucose à 1% (Réagit)
• Tube B : 2 ml de saccharose à 1% (Réagit, oligo-saccharide)
• Tube C : 2 ml d'amidon à 1% (Réagit, poly-saccharide)
• Tube D : 2 ml d'eau distillée (Ne réagit pas)

Pour chaque tube, ajouter 2 gouttes de réactif de Molisch et bien mélanger. Incliner le tube à essai et ajouter lentement 2 ml d'acide sulfurique concentré le long des parois. Si la réaction est positive, un anneau violet se forme à l'interface de la solution.

2. Réaction de Seliwanoff

Cette réaction permet de différencier les aldoses des cétoses. Les cétoses, par l'action de HCl, forment des dérivés du furfural qui se condensent avec le résorcinol pour produire un complexe rouge. Avec les aldoses, seul un chauffage prolongé peut simuler un test positif par épimérisation du glucose en fructose catalysée par HCl.

a) Réactifs

• Solutions à 1% : fructose (cétose), saccharose (cétose), glucose (aldose)
• Réactif de Seliwanoff : 0,5 g de résorcine dans 100 ml d'éthanol
• HCl 8,4 N

b) Technique

• Tube A : 1 ml de fructose à 1% (Rouge en 1 min 55 s - Réagit)
• Tube B : 1 ml de saccharose à 1% (Orange/Rouge - Réagit)
• Tube C : 1 ml de glucose à 1% (Jaune-orange - Ne réagit pas rapidement)

Ajouter 3 ml de HCl dilué et 2 ml de réactif de Seliwanoff dans chaque tube. Chauffer au bain-marie bouillant et noter le temps d'apparition de la couleur rouge.

3. Réaction de Bial

Cette réaction est spécifique aux pentoses. Chauffés avec du HCl concentré, les pentoses produisent du furfural qui se condense avec l'orcinol. En présence de sel ferrique, le produit acquiert une couleur bleue ou bleu-vert.

a) Réactifs

• HCl concentré, xylose à 1%, glucose à 1%, ribose à 1%, amidon à 1%
• Réactif de Bial : 1,5 g d'orcinol + 500 ml de HCl concentré + 30 gouttes de chlorure ferrique à 10%

b) Technique

• Tube A : 1 ml de xylose ou ribose (Vert mousse - Réagit)
• Tube B : 1 ml de glucose à 1% (Brun - Ne réagit pas)
• Tube C : 1 ml d'amidon à 1% (Brun - Ne réagit pas)

Ajouter 10 gouttes de réactif de Bial, mélanger et chauffer au bain-marie bouillant. L'apparition d'une couleur verte indique une réaction positive.

4. Réaction à l'iode

Ce test est utilisé pour la recherche de l'amidon, qui forme un complexe bleu avec l'iode. Ce complexe se dissocie au chauffage et se reforme au refroidissement.

a) Réactifs

• Solution d'amidon à 1%
• Solution de glucose à 1%
• Solution de Lugol (iode)

b) Technique

• Tube A : 1 ml de glucose à 1% + 1 goutte de Lugol
• Tube B : 1 ml d'amidon à 1% + 1 goutte de Lugol

Observer l'apparition de la couleur bleue. Chauffer au bain-marie bouillant (devient transparent), puis refroidir à l'eau courante (retour à la couleur bleue).